如何正確對(duì)液相色譜儀進(jìn)行檢定？
2022-04-18
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液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。
液相色譜儀的檢定方法：
1.秒表：分度值小于0.1s。
2.分析天平：zui大稱(chēng)量200g，zui小分度值0.1mg。
3.容量瓶
4.微量注射器
5.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和試劑
6.檢定方法：
a.泵流量設(shè)定值誤差Ss、流量穩(wěn)定性誤差SR的檢定。將儀器的輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣器、色譜柱和檢測(cè)器聯(lián)接好，以甲醇為液動(dòng)相，按表1設(shè)定流量，待流速穩(wěn)定后，在流動(dòng)相排出口用事先清洗稱(chēng)重過(guò)的容量瓶收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，準(zhǔn)確地收集10～25分鐘，稱(chēng)重，按下式計(jì)算Ss和SR。Ss=(Fm—Fs)/Fs×100%SR=(Fmax—Fmin)/F×100%式中Ss為流量設(shè)定值誤差(%)；Fm=(W2—W1)ρt·t為流量實(shí)測(cè)值；W2：容量瓶+流動(dòng)相的重量(g)；W1：容量瓶的重量(g)；Fs：流量設(shè)定值(ml/min)；ρt：實(shí)驗(yàn)溫度下流動(dòng)相的密度(g/cm3)；t：收集流動(dòng)相的時(shí)間(min)；SR：流量穩(wěn)定性誤差(%)；Fmax：同一組測(cè)量中流量zui大值(ml/min)；Fmin：同一組測(cè)量中流量zui小值(ml/min)； F：同一組測(cè)量中的算術(shù)平均值(ml/min)。
b.定性、定量測(cè)量重復(fù)性的檢定 將儀器聯(lián)接好，使之處于正常工作狀態(tài)，用進(jìn)樣閥的定量管注入適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液(萘或聯(lián)苯)或穩(wěn)定的待分析樣品溶液，記錄保留時(shí)間和峰面積，連續(xù)測(cè)量5次，按下式計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD。
c.紫外檢測(cè)器性能
可調(diào)波長(zhǎng)紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性誤差的檢定將檢測(cè)器與記錄儀聯(lián)好，接通電源穩(wěn)定后，先將檢測(cè)波長(zhǎng)調(diào)至235nm，用甲醇用流動(dòng)相，流速1.0ml/min，用進(jìn)樣器注入重鉻酸鉀的硫酸溶液(取120℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg，精密稱(chēng)定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml，搖勻，即得)20ul，待出峰時(shí)立即停泵，改用波長(zhǎng)掃描方式，得到重鉻酸鉀在紫外-可見(jiàn)光區(qū)的吸收曲線(xiàn)，記錄其在235nm、257nm、313nm、350nm附近波長(zhǎng)處的zui大或zui小吸收波長(zhǎng)，分別找出各點(diǎn)zui大或zui小波長(zhǎng)與標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)之差即為波長(zhǎng)示值誤差；重復(fù)測(cè)定3次，各點(diǎn)zui小與zui大值之差即為波長(zhǎng)重復(fù)性誤差。
基線(xiàn)漂移和基線(xiàn)噪聲的檢定將儀器各部分聯(lián)接好，紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)調(diào)到254nm，流動(dòng)相為100%甲醇，流速為1.0ml/min，吸收度范圍選擇較靈敏檔，開(kāi)機(jī)，待基線(xiàn)穩(wěn)定后，記錄基線(xiàn)30-40分鐘，計(jì)算基線(xiàn)漂移和噪聲。
較小檢測(cè)濃度在靜態(tài)條件下，用進(jìn)樣器注入4×10-8g/ml萘的甲醇溶液，樣品峰高應(yīng)大于或等于兩倍基線(xiàn)噪聲峰高，按下式計(jì)算zui小檢測(cè)濃度。 Cl=2×HN×C /H式中，Cl：zui小檢測(cè)濃度(g/ml)；HN：噪聲峰高(記錄儀器數(shù)或?qū)崪y(cè)高度cm)；C：樣品濃度(g/ml)；H：樣品峰高(記錄儀器數(shù)或?qū)崪y(cè)高度cm)。
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